ニワトリDNA抽出

準備:

材料名	補足	数量
チューブ立て		1個
フローター		1個
チューブ		3本
つまようじ		2本
シリンジ		1個
綿球		2個
スポイト		1本
ラップ
エタノール
細胞溶解液	13%食塩、0.1％界面活性剤（洗剤数滴）
ニワトリレバー
湯煎用の容器	発泡スチロールなど保温性のあるものがよい

観察・実験:

題目	内容	画像	所要時間
1．【準備】	①チューブ3本の内2本に細胞溶解液、エタノールを約1mLずつ分注する。 ②熱湯（80℃以上）を準備しておく。 ③ニワトリのレバーをラップに1cmサイズに切り分ける（脂肪をさけ、赤い部分を使用すること）。
2．【実験】	①レバーをラップの上から空いたチューブの裏など※でよくつぶす。（※手などの熱が加わらないよう注意）
3．	②つぶしたレバーをつまようじでスイカの種くらいの大きさで取り、細胞溶解液入りのチューブに入れる。
4．	③細胞溶解液に色がつくまで、つまようじでよく混ぜる。
5．	④チューブのふたをしめ、フローターに差し込み、80℃のお湯で10分間加熱する。
6．	⑤綿球2個を注射器に入れ、ピストンを押し込む。
7．	⑥注射器にチューブの中身を入れる。
8．	⑦空いたチューブをチューブ立に入れ、その上でピストンを押してろ過する。泡が出てきたらやめる。
9．	⑧透明のろ液をスポイトでとり、1，2滴をエタノール入りのチューブに加える。
10．	⑨エタノール入りのチューブのふたをしめ、ゆっくり上下をひっくり返して混ぜる。

豆知識:

• ヒトは約37兆個の細胞からできている※ ※従来は60兆個とされていたが、近年ではEvaBianoniらの研究による数が採用されることが多い。 E. Bianoni et al, An estimation of the number of cells in the human body. Ann. Hum. Biol. 40, 463–471 (2013).
• 細胞の直径は平均20㎛
• たった1個の細胞(受精卵)が分裂してできている
• 細胞の中にある核にDNAは存在する
• DNAは2重らせん構造をとる
• ヒトのDNAは約30億塩基対からなる長い分子で、1つの細胞のDNAを引き伸ばすと約2mになる
• 塩水と洗剤は細胞をばらばらにしたり壊したりする。DNAは水に溶けるがエタノールには溶けないので、エタノールを混ぜると析出して観察できる
• DNAの2重らせん構造の直径は2nm程度なので、光学顕微鏡や一般的な電子顕微鏡では観察が難しい。

注意事項:

熱湯や実験器具の取り扱いに注意する。

資料:

• 印刷用資料